外泌體研究又一利器 — IZON外泌體分離鑒定系統(tǒng)
2019/3/27
外泌體研究又一利器 — IZON外泌體分離鑒定系統(tǒng)
近幾年外泌體研究火熱，文章數(shù)量一直居高不下，國內(nèi)的外泌體研究起步較晚，但從趨勢來看，國內(nèi)的外泌體研究正在逐漸加速發(fā)展。
越來越多的研究者將外泌體與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)聯(lián)系起來，特別是液體活檢方向，相信假以時(shí)日，外泌體必然為疾病的診斷與治療帶來重大改革。
廣州云星科學(xué)儀器有限公司順應(yīng)科研需求，代理了IZON公司針對(duì)外泌體研究而開發(fā)的利器 — 外泌體分離鑒定系統(tǒng)，這將為外泌體的研究帶來全新的視角。
TRPS—可控電阻式脈沖傳感技術(shù)
Tunable Resistive Pulse Sensing（TRPS )是目前可用于納米粒子表征的功能最強(qiáng)大的技術(shù)，也是納米粒子研究、發(fā)展和質(zhì)控中重要的工具，該技術(shù)的應(yīng)用在納米醫(yī)學(xué)和細(xì)胞外囊泡研究的領(lǐng)域中尤為突出。IZON公司所開發(fā)的外泌體分離鑒定系統(tǒng)正是基于該原理。
TRPS技術(shù)基于阻抗原理，與激光無關(guān)。當(dāng)充滿電解液的納米孔上下兩邊施加一定的電壓時(shí)，納米孔內(nèi)會(huì)產(chǎn)生離子電流。當(dāng)顆粒通過納米孔會(huì)取代一定的電解液增加電阻，繼而產(chǎn)生電阻脈沖信號(hào)，該脈沖信號(hào)大小與顆粒的體積成正比。
TRPS 技術(shù)應(yīng)用
鑒于分子尺寸已能得到測定且亞微尺寸受到人們較高的關(guān)注度，TRPS目前主要關(guān)注范圍是亞微米的樣品，檢測對(duì)象是尺寸范圍為40 nm -10 μm的顆粒。顆粒大小和濃度的檢測通過使用已知尺寸和濃度的校正顆粒來實(shí)現(xiàn)。當(dāng)顆粒流經(jīng)納米孔，會(huì)產(chǎn)生一個(gè)電阻脈沖信號(hào)，通過該信號(hào)和校正顆粒的對(duì)比，來實(shí)現(xiàn)顆粒特征的逐個(gè)測定。
· 1. 顆粒大小和濃度的檢測通過使用已知尺寸和濃度的校正顆粒來實(shí)現(xiàn)。當(dāng)顆粒流經(jīng)納米孔，會(huì)產(chǎn)生一個(gè)電阻脈沖信號(hào)，通過該信號(hào)和校正顆粒的對(duì)比，來實(shí)現(xiàn)顆粒特征的逐個(gè)測定。
· 2. 顆粒流速與顆粒濃度成正比，所以可以準(zhǔn)確測定不同尺寸的顆粒濃度。于此同時(shí)，可以逐個(gè)測得每個(gè)顆粒的尺寸。TRPS的核心理念在于可以同時(shí)提供準(zhǔn)確的顆粒濃度和顆粒尺寸分布。
1 尺寸測定
TRPS中的離子電流電阻式脈沖單顆粒通過納米孔時(shí)的，可視離子電流“脈沖”單電流脈沖特寫展示特征脈沖形狀TRPS現(xiàn)可用于測定納米顆粒和不同來源的EVs的真實(shí)尺寸分布。請(qǐng)注意下圖中的縱軸代表不同尺寸范圍內(nèi)顆粒的個(gè)數(shù)濃度，而不是比率。TRPS技術(shù)是目前唯一可以實(shí)現(xiàn)可靠顆粒測定的方法 。任何高可信度的顆粒研究項(xiàng)目或者跟顆粒相關(guān)的規(guī)定都需要數(shù)據(jù)具有高可靠性和易得性。TRPS能夠提供高質(zhì)量的測量數(shù)據(jù)（如尺寸分布及顆粒濃度）并有望推動(dòng)納米顆粒研究的快速發(fā)展。
2 濃度測定
TRPS技術(shù)能獲得非常準(zhǔn)確的濃度信息：顆粒速度與濃度成正比關(guān)系，與顆粒組成無關(guān)，因此，一定尺寸范圍內(nèi)的顆粒濃度（Cmin-Cmax）可通過已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到。對(duì)于一張完整的數(shù)據(jù)圖，需要同時(shí)提供顆粒濃度和尺寸分布，然而許多應(yīng)用中，提供更簡單的數(shù)據(jù)也同樣合適。TRPS利用簡單且可驗(yàn)證的方法提供準(zhǔn)確、可靠的濃度。
3 尺寸電荷測定，包括Zeta電勢
TRPS技術(shù)通過分析單個(gè)顆粒在不同驅(qū)動(dòng)力下電阻式脈沖的持續(xù)時(shí)間，跟已知尺寸、表面電荷和個(gè)數(shù)濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品比較，來逐個(gè)測定顆粒的表面電荷。每個(gè)脈沖的寬度與顆粒穿過錐形孔有關(guān)，通過分析脈沖寬度，可以獲得每個(gè)顆粒的速度。通過測定顆粒速度，可以獲得每個(gè)顆粒的電泳淌度，意味著可以同時(shí)獲得顆粒的尺寸和電荷信息。跟大多數(shù)電荷測定技術(shù)一樣，電泳淌度可以簡單的轉(zhuǎn)換為Zeta電勢。
上圖展示了不同腦脊液樣品EVs的尺寸和帶電情況，表明TRPS技術(shù)提供的EVs詳細(xì)的電荷分析是一個(gè)十分實(shí)用的研究工具。來源于健康人樣品（綠點(diǎn)）的顆粒平均Zeta電勢為-17 mV，而來自于疾病樣品（紫點(diǎn)）則為-15 mV（顆粒均溶于PBS溶液）。（校正顆粒以橙色顯示）
外泌體分離鑒定系統(tǒng)
qNano
qNano 利用可控電阻式脈沖感應(yīng)（TRPS）原理進(jìn)行顆粒測定。功能強(qiáng)大且測量精準(zhǔn)，取代了舊式激光測量方法。單一顆粒測量具有最高精度和可重復(fù)性，可用于測量：
? 尺寸及真實(shí)粒徑分布
? 特定尺寸范圍內(nèi)的顆粒濃度
? 基于逐個(gè)顆粒的顆粒表面電荷測定
主要應(yīng)用：
細(xì)胞外囊泡：外泌體|微粒|全血細(xì)胞|血小板
納米醫(yī)學(xué)：脂質(zhì)體|納米/微泡|高分子藥物輸送|能顆粒|免疫檢測功能顆粒
病毒和疫苗特性描述：病毒|疫苗|細(xì)菌
qEV 細(xì)胞外囊泡（外泌體）分離柱
多種規(guī)格分離柱可供選擇，實(shí)驗(yàn)體積從0.1ml到100ml，滿足不同實(shí)驗(yàn)需求，最大程度降低實(shí)驗(yàn)操作成本。
AFC自動(dòng)收集器
取代手工收集濾液，用于自動(dòng)定量收集分離柱中流出的液滴,達(dá)到把不同活性組分裝到不同試管中去的目的。它將進(jìn)一步提高EV隔離的可重復(fù)性，并為您節(jié)省手動(dòng)觀察份數(shù)所需的時(shí)間。
很多研究人員懷疑自己養(yǎng)的細(xì)胞能不能做外泌體研究，其實(shí)不用擔(dān)心，外泌體已知是細(xì)胞之間傳遞信息的信使，細(xì)胞沒有獨(dú)立存在的，任何表型的改變（腫瘤侵襲，干細(xì)胞修復(fù)，組織再生，胚胎發(fā)育等）都是經(jīng)過細(xì)胞傳遞，外泌體介導(dǎo)的。相信這套外泌體分離鑒定系統(tǒng)能夠給您的研究帶來意想不到的結(jié)果！
